Validación de un método analítico para la cuantificación de alcaloides totales
Palabras clave:
alcaloides de belladona, estudios de validación, industria farmacéutica.Resumen
Introducción: La validación de métodos analíticos asegura la reproducibilidad de datos cuando se desea realizar la cuantificación de un producto, mediante metodologías diferentes a las establecidas en documentos oficiales.
Objetivo: Validar un método analítico por espectrofotometría ultravioleta-visible para la cuantificación de alcaloides totales.
Métodos: Se utilizó un preparado galénico que contiene 0,1 % de extracto de belladona para determinar los parámetros de validación mediante un método espectrofotométrico ultravioleta-visible a 435 nm, a partir de la precipitación de alcaloides por la interacción con el reactivo de Dragendorff. La especificidad utilizó una concentración de 100 %, mientras, linealidad requirió muestras de 80 %, 90 %, 100 %, 110 % y 120 %; y, en el caso del rango, al 80 % y 120 %. La precisión evaluó la repetibilidad al 80 %, 100 % y 120 %, y, la precisión intermedia requirió una muestra al 100 % considerando condiciones interanalistas, interequipos e interdías. Finalmente, en exactitud, concentraciones de 80 %, 100 % y 120 %; y, en robustez se analizó una muestra al 100 % para determinar variación de pH y velocidad de centrifugación.
Resultados: La selectividad obtuvo valores aceptables tanto en la matriz como el producto elaborado, la linealidad presentó coeficientes de correlación y determinación próximos a 1, y el rango de concentración se encontró entre 40 - 60 mg/L. Exactitud, precisión y robustez tuvieron una variabilidad menor al 2 %.
Conclusiones: El método espectrofotométrico ultravioleta-visible es selectivo, lineal, exacto, preciso y robusto; es confiable en la determinación de alcaloides precipitables.
Descargas
Los datos de descargas todavía no están disponibles.
Citas
1. Sharma M, Kaushik P. Vegetable phytochemicals: An update on extraction and analysis techniques. Biocatal Agric Biotechnol. 2021; 36:102149. DOI: 10.1016/j.bcab.2021.102149
2. Bhambhani S, Kondhare KR, Giri AP. Diversity in chemical structures and biological properties of plant alkaloids. Molecules. 2021; 26(11): 3374. DOI: 10.3390/molecules26113374
3. Pott D, Osorio S, Vallarino JG. From central to specialized metabolism: An overview of some secondary compounds derived from the primary metabolism for their role in conferring nutritional and organoleptic characteristics to fruit. Front Plant Sci. 2019; 10: 835. DOI: 10.3389/fpls.2019.00835
4. Banerjee A, Panda G. Total synthesis of selected bioactive alkaloids, their structure-function relationships and molecular target interactions: A comparative synthetic analysis of tryptophan originated chiral pool approaches vs other synthons. Results Chem. 2021; 3:100215. DOI: 10.1016/j.rechem.2021.100215
5. Zhang Z, Li Y, Sun Y, Wang W, Song X, Zhang D. Chemical diversity and biological activities of marine-derived sulphur containing alkaloids: A comprehensive update. Arab J Chem. 2023; 16(9):105011. DOI: 10.1016/j.arabjc.2023.105011
6. Rajput A, Sharma R, Bharti R. Pharmacological activities and toxicities of alkaloids on human health. Mater Today Proc. 2022; 48:1407-15. DOI: 10.1016/j.matpr.2021.09.189
7. Efferth T, Oesch F. Repurposing of plant alkaloids for cancer therapy: Pharmacology and toxicology. Semin Cancer Biol. 2021; 68:143-63. DOI: 10.1016/j.semcancer.2019.12.010
8. Yang M, Ma J, Ruan J, Zhang C, Ye Y, Pi-Cheng Fu P, et al. Absorption difference between hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids and their N-oxides - Mechanism and its potential toxic impact. J Ethnopharmacol. 2020; 249:112421. DOI: 10.1016/j.jep.2019.112421
9. Sattler M, Müller V, Bunzel D, Kulling SE, Soukup ST. Pyrrolizidine alkaloids in borage (Borago officinalis): Comprehensive profiling and development of a validated LC-MS/MS method for quantification. Talanta. 2023; 258:124425. DOI: 10.1016/j.talanta.2023.124425
10. Khedr T, Juhász A, Singh KB, Foley R, Nye-Wood MG, Colgrave ML. Development and validation of a rapid and sensitive LC-MS/MS approach for alkaloid testing in different Lupinus species. J Food Compost Anal. 2023; 121:105391. DOI: 10.1016/j.jfca.2023.105391
11. Suselo YH, Indarto D, Wasita B, Hartono H. Alkaloid fraction of Mirabilis jalapa Linn. flowers has low cytotoxicity and increases iron absorption through Erythropoietin-Matriptase-2-Hepcidin pathway in iron deficiency Hepatocarcinoma cell model. Saudi J Biol Sci. 2023; 30(1):103508. DOI: 10.1016/j.sjbs.2022.103508
12. Girard MFC, Knight P, Hopfgartner G. Vacuum differential mobility spectrometry combined with column-switching liquid chromatography- mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids in tea samples. J Chromatogr A. 2023; 1705:464174. DOI: 10.1016/j.chroma.2023.464174
13. International Conference on Harmonisation. ICH harmonized tripartite guideline: validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R1). California: ICH; 2005 [acceso: 13/07/2023]. Disponible en: https://somatek.com/wp-content/uploads/2014/06/sk140605h.pdf
14. Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Bioanalytical method validation. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Veterinary Medicine (CMV). Rockville: FDA; 2018. [acceso: 14/08/2023]. Disponible en: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf
15. Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Analytical procedures and methods validation for drugs and biologics. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Biologics Evaluation and Research (CBER). Rockville: FDA; 2015. [acceso: 14/08/2023]. Disponible en: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Analytical-Procedures-and-Methods-Validation-for-Drugs-and-Biologics.pdf
16. Asociación Española de Farmacéuticos de la Industria. Validación de métodos analíticos. Barcelona: AEFI; 2001.
17. Sreevidya N, Mehrotra S. Spectrophotometric method for estimation of alkaloids precipitable with Dragendorff's reagent in plant materials. J AOAC Int 2003 [acceso: 25/06/2023]; 86(6): 1124-7. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14979692/
18. Ajanal M, Gundkalle M, Nayak S. Estimation of total alkaloid in Chitrakadivati by UV-Spectrophotometer. Anc Sci Life. 2012; 31(4): 198-201. DOI: 10.4103/0257-7941.107361
19. The Unites States Convention. Farmacopea de los Estados Unidos de América: Formulario Nacional, Compendios de normas oficiales. Validación de procedimientos farmacopeicos. USP 44 - NF 39. EE. UU., Rockville: U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 2022, pp: 8387-8393.
20. Versilovskis A, Mulder P, Pereboom D, Stoppelaar J, Nijs M. Simultaneous quantification of ergot and tropane alkaloids in bread in the Netherlands by LC-MS/MS. Food Addit Contam 2020; 13(3): 215-23. DOI: 10.1080/19393210.2020.1771777
21. Eugelio F, Palmieri S, Fanti f, Messuri L, Pepe A, Compagnone D, et al. Development of an HPLC-MS/MS method for the determination of alkaloids in lupins. Molecules 2023; 28(4): 1531. DOI: 10.3390/molecules28041531
2. Bhambhani S, Kondhare KR, Giri AP. Diversity in chemical structures and biological properties of plant alkaloids. Molecules. 2021; 26(11): 3374. DOI: 10.3390/molecules26113374
3. Pott D, Osorio S, Vallarino JG. From central to specialized metabolism: An overview of some secondary compounds derived from the primary metabolism for their role in conferring nutritional and organoleptic characteristics to fruit. Front Plant Sci. 2019; 10: 835. DOI: 10.3389/fpls.2019.00835
4. Banerjee A, Panda G. Total synthesis of selected bioactive alkaloids, their structure-function relationships and molecular target interactions: A comparative synthetic analysis of tryptophan originated chiral pool approaches vs other synthons. Results Chem. 2021; 3:100215. DOI: 10.1016/j.rechem.2021.100215
5. Zhang Z, Li Y, Sun Y, Wang W, Song X, Zhang D. Chemical diversity and biological activities of marine-derived sulphur containing alkaloids: A comprehensive update. Arab J Chem. 2023; 16(9):105011. DOI: 10.1016/j.arabjc.2023.105011
6. Rajput A, Sharma R, Bharti R. Pharmacological activities and toxicities of alkaloids on human health. Mater Today Proc. 2022; 48:1407-15. DOI: 10.1016/j.matpr.2021.09.189
7. Efferth T, Oesch F. Repurposing of plant alkaloids for cancer therapy: Pharmacology and toxicology. Semin Cancer Biol. 2021; 68:143-63. DOI: 10.1016/j.semcancer.2019.12.010
8. Yang M, Ma J, Ruan J, Zhang C, Ye Y, Pi-Cheng Fu P, et al. Absorption difference between hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids and their N-oxides - Mechanism and its potential toxic impact. J Ethnopharmacol. 2020; 249:112421. DOI: 10.1016/j.jep.2019.112421
9. Sattler M, Müller V, Bunzel D, Kulling SE, Soukup ST. Pyrrolizidine alkaloids in borage (Borago officinalis): Comprehensive profiling and development of a validated LC-MS/MS method for quantification. Talanta. 2023; 258:124425. DOI: 10.1016/j.talanta.2023.124425
10. Khedr T, Juhász A, Singh KB, Foley R, Nye-Wood MG, Colgrave ML. Development and validation of a rapid and sensitive LC-MS/MS approach for alkaloid testing in different Lupinus species. J Food Compost Anal. 2023; 121:105391. DOI: 10.1016/j.jfca.2023.105391
11. Suselo YH, Indarto D, Wasita B, Hartono H. Alkaloid fraction of Mirabilis jalapa Linn. flowers has low cytotoxicity and increases iron absorption through Erythropoietin-Matriptase-2-Hepcidin pathway in iron deficiency Hepatocarcinoma cell model. Saudi J Biol Sci. 2023; 30(1):103508. DOI: 10.1016/j.sjbs.2022.103508
12. Girard MFC, Knight P, Hopfgartner G. Vacuum differential mobility spectrometry combined with column-switching liquid chromatography- mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids in tea samples. J Chromatogr A. 2023; 1705:464174. DOI: 10.1016/j.chroma.2023.464174
13. International Conference on Harmonisation. ICH harmonized tripartite guideline: validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R1). California: ICH; 2005 [acceso: 13/07/2023]. Disponible en: https://somatek.com/wp-content/uploads/2014/06/sk140605h.pdf
14. Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Bioanalytical method validation. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Veterinary Medicine (CMV). Rockville: FDA; 2018. [acceso: 14/08/2023]. Disponible en: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf
15. Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Analytical procedures and methods validation for drugs and biologics. U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Biologics Evaluation and Research (CBER). Rockville: FDA; 2015. [acceso: 14/08/2023]. Disponible en: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Analytical-Procedures-and-Methods-Validation-for-Drugs-and-Biologics.pdf
16. Asociación Española de Farmacéuticos de la Industria. Validación de métodos analíticos. Barcelona: AEFI; 2001.
17. Sreevidya N, Mehrotra S. Spectrophotometric method for estimation of alkaloids precipitable with Dragendorff's reagent in plant materials. J AOAC Int 2003 [acceso: 25/06/2023]; 86(6): 1124-7. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14979692/
18. Ajanal M, Gundkalle M, Nayak S. Estimation of total alkaloid in Chitrakadivati by UV-Spectrophotometer. Anc Sci Life. 2012; 31(4): 198-201. DOI: 10.4103/0257-7941.107361
19. The Unites States Convention. Farmacopea de los Estados Unidos de América: Formulario Nacional, Compendios de normas oficiales. Validación de procedimientos farmacopeicos. USP 44 - NF 39. EE. UU., Rockville: U.S. Pharmacopeial Convention, Inc. 2022, pp: 8387-8393.
20. Versilovskis A, Mulder P, Pereboom D, Stoppelaar J, Nijs M. Simultaneous quantification of ergot and tropane alkaloids in bread in the Netherlands by LC-MS/MS. Food Addit Contam 2020; 13(3): 215-23. DOI: 10.1080/19393210.2020.1771777
21. Eugelio F, Palmieri S, Fanti f, Messuri L, Pepe A, Compagnone D, et al. Development of an HPLC-MS/MS method for the determination of alkaloids in lupins. Molecules 2023; 28(4): 1531. DOI: 10.3390/molecules28041531
Publicado
10.05.2024
Cómo citar
1.
Zavaleta Juárez ME, Castillo Saavedra EF, La Cunza Méndez AD, Noriega Oblitas JM, Reyes Alfaro CE. Validación de un método analítico para la cuantificación de alcaloides totales. Rev Cubana Med Milit [Internet]. 10 de mayo de 2024 [citado 2 de abril de 2025];53(2):e024025549. Disponible en: https://revmedmilitar.sld.cu/index.php/mil/article/view/25549
Número
Sección
Artículo de Investigación
Licencia
Aquellos autores/as que tengan publicaciones con esta revista, aceptan los términos siguientes:- Los autores/as conservarán sus derechos de autor y garantizarán a la revista el derecho de primera publicación de su obra, el cual estará simultáneamente sujeto a la Licencia de reconocimiento de Creative Commons. Los contenidos que aquí se exponen pueden ser compartidos, copiados y redistribuidos en cualquier medio o formato. Pueden ser adaptados, remezclados, transformados o creados otros a partir del material, mediante los siguientes términos: Atribución (dar crédito a la obra de manera adecuada, proporcionando un enlace a la licencia, e indicando si se han realizado cambios); no-comercial (no puede hacer uso del material con fines comerciales) y compartir-igual (si mezcla, transforma o crea nuevo material a partir de esta obra, podrá distribuir su contribución siempre que utilice la misma licencia que la obra original).
- Los autores/as podrán adoptar otros acuerdos de licencia no exclusiva de distribución de la versión de la obra publicada (p. ej.: depositarla en un archivo telemático institucional o publicarla en un volumen monográfico) siempre que se indique la publicación inicial en esta revista.
- Se permite y recomienda a los autores/as difundir su obra a través de Internet (p. ej.: en archivos telemáticos institucionales o en su página web) antes y durante el proceso de envío, lo cual puede producir intercambios interesantes y aumentar las citas de la obra publicada.
